電泳轉(zhuǎn)移緩沖液的作用,你了解多少?
更新時間:2022-02-21 點擊次數(shù):1290次
在生化實驗時做DNA或蛋白質(zhì)電泳時,都會用到緩沖劑,電流通過水(H2O)時,在陽極發(fā)生氧化反應(yīng),生成氧氣以及氫離子;在陰極發(fā)生還原反應(yīng),生成氫氣以及氫氧根離子。長時間電泳將會使陽極變酸,陰極變堿。一個好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)該有較強的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本穩(wěn)定。
電泳轉(zhuǎn)移緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持溶液的pH穩(wěn)定。電流通過水(H2O)時,在陽極發(fā)生氧化反應(yīng),生成氧氣以及氫離子;在陰極發(fā)生還原反應(yīng),生成氫氣以及氫氧根離子。長時間電泳將會使陽極變酸,陰極變堿。一個好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)該有較強的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本穩(wěn)定。電泳緩沖液的另一個作用是使溶液帶有一定的導(dǎo)電性,以利于DNA分子的遷移。DNA為堿性物質(zhì),在電泳時帶負電荷,由負極向正極遷移。
電泳轉(zhuǎn)移緩沖液還有一個組分是EDTA,目的是螯合Mg2+等離子,防止電泳時激活DNA酶。由于核酸酶需要這些離子,EDTA可以將這些離子牢牢抓住,避免核酸降解。但要注意的是,鎂離子同時是很多酵素的輔助因子,如限制酶、DNA聚合酶等等,因此EDTA的濃度一般不會太高。
電泳轉(zhuǎn)移緩沖液電泳時正極與負極都會發(fā)生電解反應(yīng),正極發(fā)生的是氧化反應(yīng),負極發(fā)生的是還原反應(yīng),長時間的電泳將使正極變酸,負極變堿。一個好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強的緩沖能力,是溶液兩極的pH保持基本不變。電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性,以利于DNA分子的遷移。