如何使用HE染色試劑盒對(duì)組織切片進(jìn)行染色?
更新時(shí)間:2023-06-19 點(diǎn)擊次數(shù):960次
HE染色試劑盒是一種用于組織學(xué)研究中的常見(jiàn)染色試劑盒,可以將組織切片中的細(xì)胞核和胞質(zhì)染色為藍(lán)色和粉紅色,以便觀察和分析組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形態(tài)和組織學(xué)特征等。其中HE代表HematoxylinandEosin,即血紅木素和伊紅(亦稱為嗜酸性粉紅)兩種染料。
下面是使用
HE染色試劑盒對(duì)組織切片進(jìn)行染色的步驟:
1、制備組織切片
首先需要從動(dòng)物或人體中取得組織標(biāo)本,經(jīng)過(guò)固定、脫水、透明化等處理后制備成切片。切片應(yīng)該保持薄而均勻,通常厚度為4-6微米。
2、蠟片解蠟和再水化
將切片放置在65℃的恒溫箱中15-30分鐘,使其蠟質(zhì)被溶解。然后使用梯度乙醇和去離子水進(jìn)行再水化處理,以去除殘留的蠟質(zhì)并使切片恢復(fù)至其原始狀態(tài)。
3、染色
將切片依次置于hematoxylin染液、酸性酒紅染液和70%乙醇中浸泡,每個(gè)步驟持續(xù)時(shí)間大約為5-10分鐘。然后將切片置于95%乙醇中漂洗,直至顏色不再流出。最后將切片轉(zhuǎn)移到100%乙醇中,待其干燥。
4、封片
將切片置于玻片上,使用透明樹(shù)脂或類似物質(zhì)覆蓋并固定切片。最后在覆蓋片上滴上封片劑,以保護(hù)樣本并增加顯微鏡下的清晰度。
需要注意的是,在染色過(guò)程中要嚴(yán)格控制每一步的時(shí)間和試劑濃度,以確保染色效果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。此外,HE染色試劑盒中的試劑存放應(yīng)當(dāng)避免陽(yáng)光直射和高溫環(huán)境,以免影響試劑品質(zhì)。